PCR儀設(shè)置指南

PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）是利用DNA在體外攝氏95°高溫時(shí)變性會(huì)變成單鏈，低溫（經(jīng)常是60°C左右）時(shí)引物與單鏈按堿基互補(bǔ)配對(duì)的原則結(jié)合，再調(diào)溫度至DNA聚合酶適反應(yīng)溫度（72°C左右），DNA聚合酶沿著磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互補(bǔ)鏈。PCR儀實(shí)際就是一個(gè)溫控設(shè)備，能在95℃，55℃，72℃之間很好地進(jìn)行溫度控制。應(yīng)用PCR儀設(shè)置指南如下：

1、按 PCR 儀正面左下角電源開關(guān)，啟動(dòng) PCR 儀。

2、放 PCR 離心管，先把頂蓋向上扳，再往前推，露出放樣孔，PCR 管放入前應(yīng)加好反應(yīng)體系各組分，再放入 PCR 離心管。

3、反向重復(fù)第2步驟將頂蓋板向后拉，蓋好頂蓋。

4、按 F2“Create”新建一個(gè)擴(kuò)增的 PCR 程序。

5、按控制臺(tái)面右方上下左右方向鍵，可隨意移動(dòng)編輯位置，輸入需要的溫度、時(shí)間、循環(huán)數(shù)等。

6、據(jù) PCR 離心管中加入的反應(yīng)體積總量，在“Reaction volume”后輸入相應(yīng)數(shù)值，有 Std“1～100ul”和 9600“1~50ul”兩檔可供選擇。

7、按 F1“Start”啟動(dòng)

8、按“INFO”對(duì)應(yīng)鍵查看 PCR 結(jié)束鍵。

9、擴(kuò)增完成后按臺(tái)面左方“Stop”鍵退出。

10、按“Hist”，可查看上次擴(kuò)增的歷史記錄。

11、完全退出后，按臺(tái)面左下方電源開關(guān)，拔出插銷，切斷電源。